产品货号:
YTB1295
中文名称:
S标签多肽
英文名称:
S Tag Peptide
产品规格:
200μL|1mL|25mg
发货周期:
1~3天
产品价格:
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S标签多肽是一种常用于通过竞争性结合抗S标签抗体,从而在免疫沉淀时洗脱与抗S标签抗体结合的S标签融合表达蛋白的多肽。本制品不仅可以用于Anti-S Tag Magnetic Beads免疫沉淀时S标签融合表达蛋白的洗脱,也可以用于常规的抗S标签抗体免疫沉淀时S标签融合表达蛋白的洗脱。
本制品竞争性洗脱S标签融合表达蛋白后,洗脱后的样品中不含抗S标签抗体的轻链和重链,可以有效解决免疫沉淀后Western检测时轻链和重链的干扰问题。普通的免疫沉淀,通常是通过加入上样缓冲液煮沸从而使S标签融合表达蛋白进入到溶液中,但此时抗S标签抗体的轻链和重链也会进入到溶液中,并很可能会干扰后续的Western检测。
别名 | S Tag;S Synthetic Peptide;S Tag Peptide |
纯度 | ~98% by HPLC |
分子式 | C73H117N23O25S |
分子量 | ~1748.91 |
氨基酸序列 | Lys-Glu-Thr-Ala-Ala-Ala-Lys-Phe-Glu-Arg-Gln-His-Met-Asp-Ser,which corresponds to the first 15 amino acids of the N-terminus of the original RNase A. |
序列简写 | KETAAAKFERQHMDS |
来源 | 人工合成 |
溶剂 | TBS:50mM Tris-HCl(pH7.4),150mM NaCl |
组分 | 0.2mL | 1mL | 25mg |
S标签多肽(5mg/mL) | 200μL | 1mL | - |
S标签多肽粉末 | - | - | 25mg |
保存:-20℃,有效期1年。25mg粉末装也可以4℃保存一年。
本制品5mg/mL包装产品配制在TBS中,可以直接使用。25mg为粉末装。S标签多肽常用储存液浓度为5~25mg/mL,常用使用浓度为100~400μg/mL。
由于多肽的每次冻融均会引起部分失活,所以溶液装或粉末装配制成溶液后须分装后于-20℃或更低温度冻存,以避免反复冻融。
- 对于粉末装,由于微量的多肽在冻干过程中沉积在管内,形成很薄或不可见的多肽层,所以在打开管盖前,建议在离心机中约8000~12000×g离心10~30秒,使附着在管盖或管壁上的多肽聚集于管底。
- 对于粉末装,使用TBS进行溶解,一般用移液枪的枪头轻吹几下或者轻轻摇晃瓶子,即可使多肽完全溶解。请勿用vortex剧烈振荡,以免多肽变性而失活;溶液装可直接用于后续配制。
- 免疫沉淀样品的S标签多肽竞争洗脱法:本方法为非变性法,洗脱效率高,且洗脱后的样品中不含抗S标签抗体的轻链和重链。
- S标签多肽洗脱液的配制:根据样品量确定洗脱液的用量,取一定量S标签多肽储存液用TBS溶液进一步稀释S标签多肽溶液至150μg/mL。
- 每个免疫沉淀样品加入100μL S标签多肽洗脱液(150μg/mL),冰浴并摇晃孵育30分钟~2小时,为了提高洗脱效率,可延长孵育时间或重复洗脱。S标签多肽洗脱液体积一般为凝胶悬液或磁珠悬液的5倍。
- 4℃,6000×g离心30秒,小心转移上清至新管中,上清即为洗脱的S标签融合蛋白。注意不要吸到凝胶。
- S标签多肽洗脱液的配制:根据样品量确定洗脱液的用量,取一定量S标签多肽储存液用TBS溶液进一步稀释S标签多肽溶液至150μg/mL。
- 洗脱的S标签融合蛋白置于4℃待用,或者-20℃长期保存。
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